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寧德核酸檢測實驗室之PCR裝修SICOLAB

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寧德核酸檢測實驗室之PCR裝修有哪些注意事項,首先SICOLAB實驗室技術小編帶您了解:核酸檢測實驗室之PCR實驗室是分子生物學研究和實驗的常規方法,廣泛應用于生物學各個領域,例如:艾滋病檢測、乙型肝炎、禽疫病、癌基因的檢測和診斷,DNA指紋、個體識別、親子鑒定及法醫物證,動、植物檢疫,動物及其衍生產品檢測,動物飼料、化妝品、食品衛生檢測,轉基因作物與轉基因微生物檢測等。

標準的PCR實驗室分為四個區域:試劑貯存和準備區、樣品處理區、核酸擴增區、產物分析區。為避免交叉污染,進入各個工作區域必須嚴格遵循單一方向進行,即只能從試劑貯存和準備區→標本制備區→擴増反應混合物配制和擴增區→擴增產物分析區各實驗區之間的試劑及樣品傳遞應通過傳遞窗進行。

核酸檢測實驗室之PCR實驗室建設可以是分散形式,也可以是組合形式。完成一組PCR實驗,通常應經過試劑配制、樣品處理、核酸擴增及產物分析四個實驗過程。

1、分散形式PCR實驗室建設:
所謂分散形式PCR實驗室,是指完成上述實驗過程的實驗用房彼此相距較遠,呈分散布置形式。對于這種布置形式的PCR驗室,由于各個實驗之間不易相互干擾,因此無需特殊條件要求。

2、組合形式PCR實驗室建設:
所謂組合形式PCR實驗室,是指完成PCR四個實驗過程的實驗用房相鄰布置,組成獨立實驗區域的形式。對于組合形式PCR實驗室,由于各個實驗間集中布置,容易造成相互干擾,因此,對總體布局以及屏障系統具有一定的要求。各室在入口處設緩沖間,以減少室內外空氣交換。

核酸檢測實驗室之PCR實驗室主要功能

1、試劑儲存和準備區的功能是:貯存試劑的制備、試劑的分裝和擴增反應混合液的準備,以及離心管、吸頭等消耗品的貯存和準備。貯存試劑和用于標本制備的消耗品等材料應當直接運送至試劑貯存和準備區,不能經過擴增檢測區,試劑盒中的陽性對照品及質控品不應當保存在該區,應當保存在標本處理區。

2、標本制備區的功能是:核酸(RNA、DNA)提取、貯存及其加入至擴增反應管。對于涉及臨床樣本的操作,應符合生物安全二級實驗室防護設備、個人防護和操作規范的要求。由于在樣本混合、核酸純化過程中可能會發生氣溶膠所致的污染,可通過在本區內設立正壓條件,避免從鄰近區進入本區的氣溶膠污染。為避免樣本間的交叉污染,加入待測核酸后,必須蓋好含反應混合液的反應管。對具有潛在傳染危險性的材料,必須在生物安全柜內開蓋,并有明確的樣本處理和滅活程序。

3、核酸擴增區的功能是:DNA合成、DNA擴增及檢測。為避免氣溶膠所致的污染,應當盡量減少在本區內的走動。必須注意的是,所有經過檢測的反應管不得在此區域打開。
4、擴增產物分析區的功能是:擴增片段的進一步分析測定,如雜交、酶切電泳、變性高效液相分析、測序等。核酸擴增后產物的分析方法多種多樣,如膜上或微孔板或芯片上探針雜交方法(放射性核素標記或非放射性核素標記)、直接或酶切后瓊脂糖凝膠電泳、聚丙烯酰胺凝膠電泳、Southern轉移、核酸測序方法、質譜分析等。

擴增產物分析區是PCR實驗室最主要的擴增產物污染來源,因此應注意避免通過本區的物品及工作服將擴增產物帶出。在使用PCR-ELISA方法檢測擴增產物時,必須使用洗板機洗板,廢液必須收集至1mol/LHCl中,并且不能在實驗室內傾倒,而應當至遠離PCR實驗室的地方棄掉。用過的吸頭也必須放至1mol/LHCl中浸泡后再放到垃圾袋中按程序處理,如焚燒。由于本區有可能會用到某些可致基因突變和有毒物質如溴化乙錠、丙烯酰胺、甲醛或放射性核素等,故應當注意實驗人員的安全防護。

核酸檢測實驗室之PCR實驗室建設要點

1、主體結構
主體為潔凈彩鋼板和鋁合金型材。房間內外角均采用鋁合金50內圓角鋁,解決了易污染、積灰、清洗困難的問題。結構牢固,線條簡潔美觀大方,密封性能好。
2、標準的三區分隔和壓差控制
將PCR過程分為試劑制備、樣品制備和PCR擴增檢測三個獨立的實驗區。整個區域有一個整體緩沖走廊。每個獨立的實驗區都有一個緩沖區。

PCR實驗室空調通風系統設計及壓力控制PCR實驗室并沒有嚴格的凈化要求,但是為避免各個實驗區域間交叉污染的可能性,宜采用全送全排的氣流組織形式。同時,要嚴格控制送、排風的比例以保證各實驗區的壓力要求。
3、消毒
紫外線燈安裝在三個實驗區、三個緩沖區的頂部和轉移窗內進行消毒。在試劑制備區和標本制備區還設置移動式紫外線燈,對實驗臺進行局部消毒。
4、機械連鎖不銹鋼傳遞窗
試劑和標本通過機械聯鎖不銹鋼(不推薦電子聯鎖)傳輸窗口傳輸,確保試劑和標本在傳輸過程中不受污染(人物分流)。
5、地面
地面一般采用PVC卷材地面或自流地板,整體性好。易清潔,耐腐蝕。也可以使用水磨石地面,或大瓷磚(至少800mm×800mm)接縫需要小于2mm。盡量避免產塵和積塵現象。
6、照明
燈具應選用凈化燈具,便于清潔、無塵。SICOLAB專注于提供實驗室設計建設裝修一站式服務

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